Кассета для быстрого теста на беременность крупного рогатого скота

Кассета для быстрого теста на беременность крупного рогатого скота (PAG) (плазма/сыворотка)

Цель:

Кассета для экспресс-теста на беременность крупного рогатого скота (ПАГ) (плазма/сыворотка) представляет собой иммунохроматографический анализ с латеральным потоком для качественного обнаружения гликопротеинов, связанных с беременностью, в бычьей сыворотке и плазме.

Общая информация:

Гликопротеины, ассоциированные с беременностью (ПАГ), представляют собой макромолекулы, продуцируемые плацентарной тканью и секретируемые в кровоток коровы, где они позволяют диагностировать беременность. Они играют важную роль в воспроизводстве и содержании крупного рогатого скота.

Следовательно, они могут контролировать репродуктивную активность коровы, обнаруживая ПАГ. PAG имеет различные характерные изменения как стадия репродуктивной физиологии коров, определение уровня PAG может быть использовано для точной диагностики коров во время раннего отела.

Принцип:

Кассета для экспресс-тестирования беременности крупного рогатого скота (PAG) (плазма/сыворотка) представляет собой иммунохроматографический анализ с латеральным потоком. Тест-кассета имеет тестовое окно. Во время испытаний образец помещается в трубку кассеты для образцов. Если PAG присутствует в образце плазмы или сыворотки, он вступает в реакцию с частицами коллоидного золота, покрытыми антителами против PAG в тест-полоске. Затем смесь хроматографически мигрирует вверх по мембране за счет капиллярного действия и вступает в реакцию в области тестовой линии. Если образец содержит PAG, в области тестовой линии появится цветная линия, указывающая на положительный результат. Если образец не содержит PAG, цветная линия не появится в области тестовой линии, что указывает на отрицательный результат.

Лучший период использования

Иммунный ответ на PAG был значительно усилен у коров на 24-28 день беременности. PAG достигал (12,3±4,08) нг/мл на 35-й день беременности, затем начал снижаться и продолжал расти до 56-го дня. Тестирование рекомендуется с 35-го дня после осеменения. PAG неуклонно снижается в послеродовой период, и этот анализ можно использовать у коров в возрасте 60 дней и старше после отела.

Сфера использования

Тест в основном используется для ранней диагностики беременности у крупного рогатого скота, а также для правильного обучения искусственному осеменению.

Хранить в герметичном пакете при комнатной температуре или в холодильнике (2-30 °C). Тест стабилен до истечения срока годности, указанного на запечатанной упаковке. Тест-кассета должна оставаться в запечатанной упаковке до момента использования. Не замораживать. Не использовать после истечения срока годности.

Меры безопасности

Не использовать после истечения срока годности.

Обращайтесь со всеми образцами так, как с  инфекционными агентами.

Соблюдайте предписанные меры безопасности чтобы избежать микробиологических опасностей во время тестирования и соблюдать стандартные процедуры для  надлежащей утилизации образцов.

• Надевайте одноразовые перчатки и защитные очки при тестировании образцов.
• Влажность и температура могут отрицательно сказаться на результатах.
• Не вынимайте тест-кассету из упаковки непосредственно до использования.
• Не используйте тест-набор повторно.
• Не смешивайте компоненты разных наборов или продуктов друг с другом.

материалы

Предоставленные материалы

• Тест-кассеты
• Капельницы
• Буфер

Необходимые материалы, которые не предоставляются

• Таймер
• Контейнеры для взятых проб
• Центрифуга

Сбор и подготовка образцов плазмы

Образец плазмы или сыворотки: Соберите свежую цельную кровь крупного рогатого скота, которую следует центрифугировать при 2000 об/мин в течение 5–10 минут, чтобы как можно скорее отделить сыворотку или плазму от крови во избежание гемолиза. Используйте только прозрачные негемолизированные образцы. Не оставляйте образцы при комнатной температуре на длительное время. Образцы сыворотки и плазмы можно хранить при температуре 2–8 °C до 3 дней. Для длительного хранения образцы следует хранить при температуре ниже -20 °C.

Дайте тест-кассете, образцу и буферу уравновеситься до комнатной температуры (15–30 °C) перед началом теста.

1. Извлеките тест-кассету из пакета фольги и используйте как можно скорее. Наилучшие результаты получаются, если анализ проводится в течение часа.
2. Положите тест-кассету на чистую и ровную поверхность. Держите пипетку вертикально и перенесите 1 каплю сыворотки или плазмы (приблизительно 25 мкл) в пробирку для образца (S) тест-кассеты, затем быстро добавьте 2 капли буфера (приблизительно 80 мкл) и запустите таймер. См. иллюстрацию ниже.
3. Прочитайте результаты через 10 минут. Не рекомендуется интерпретировать результаты через 20 минут.

1. 2 капли образца
2. 2 капли буфера

10 минут спустя

Положительный — появляются линии C T,

Отрицательный — линия C,

Недействительный- линия T или отсутствие линии на кассете.

Чувствительность и специфичность

Кассета экспресс-теста на беременность крупного рогатого скота (PAG) оценивалась на образцах, полученных с одной молочной фермы.

ИФА (иммуноферментный анализ) используется в качестве эталонного метода при использовании кассеты для быстрого тестирования беременности крупного рогатого скота (PAG). Результат анализа считали положительным, если ИФА указывал на положительный результат.

Относительная чувствительность: 96,59% (95°/• Cl*: 90,36°/0-99,29%)

Относительная специфичность: 95,18% (95°/0C1*: 88,12%-98,67%)

Точность: 95,91 % (95 % Cl*: 91,75–98,34 %)

Интерпретация результатов

Положительный: наличие как линии C, так и линии T, независимо от того, является ли линия T четкой или тусклой. Результат теста положительный, значит беременна.

Отрицательный: появляется только четкая линия C. Результат теста отрицательный, значит, корова не беременна.

Недействительно: когда контрольная линия не видна на мембране.

Ограничения

Кассета для экспресс-теста на беременность крупного рогатого скота (PAG) предназначена только для крупного рогатого скота.

Все результаты следует рассматривать в свете клинической информации, полученной от ветеринара.

Примечание

Эмбриональная гибель является частым явлением на ранних сроках беременности у крупного рогатого скота, однако ПАГ циркулирует у коровы на ранней стадии эмбриональной смерти и удаляется через определенный период времени для повторного тестирования или методов подтверждения беременности.